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保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材
點(diǎn)擊次數:1487 發(fā)布時(shí)間:2022-10-11
保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材
在液相分析檢測樣品的過(guò)程中,色譜柱會(huì )受到來(lái)自于樣品及色譜系統的污染,從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
來(lái)自于色譜系統的污染主要指,HPLC儀器系統中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動(dòng)相系統過(guò)濾不*殘留的固體顆粒。來(lái)自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統中,由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導致沉淀析出污染系統。
是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質(zhì)的復雜性,色譜柱受污染的情況會(huì )較加嚴重。污染會(huì )導致色譜系統壓力升、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來(lái)檢測成本,測試結果不等各種影響。
保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可降低分析柱受污染的程度,延長(cháng)分析柱使用壽命。
保護柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間,作用主要兩方面:
1.截留不溶性顆粒
2.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)
一、如何選擇保護柱?
1.保護柱的填料,與分析柱保持一致!填料品牌一致,才能確保選擇性一致。
2.保護柱的規格,要與分析柱匹配!填料粒徑一致,保護柱的內徑與分析柱的內徑相近。
3.對于精細分離,保護柱本身的裝填柱效要足夠好!
4.對于精細分離或者小內徑色譜柱分離,保護柱的連接死體積要盡可能小。
5.如果是用于UHPLC柱,還要考慮保護柱的耐壓能力。
保護柱不理想,就會(huì )導致峰擴散,分離度下降,不利于精細分離。
理想的保護柱,即使分析柱短小如4.6×100mm,安裝保護柱后也未引起分離度與峰的降低。
二、如何使用保護柱?
1.柱。避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。
2.及時(shí)更換保護柱。當峰的理論塔板數下降15%,或是柱壓上升15%,或是關(guān)鍵分離度下降15%時(shí),都應該及時(shí)更換保護柱。
3.不慎發(fā)生污染時(shí),可以將分析柱卸下,單沖洗保護柱,可以使污染物更快的從保護柱中流出?!遣豢梢月暠Wo柱。
三、保護柱使用注意事項
1.立式保護柱與分析柱連接時(shí),連接管路盡可能短,且接口切面平滑,盡量減少死體積以降低柱外展寬效應。
2.卡套式保護柱一般未標注液流方向,使用時(shí)******自行標注,并按照標注方向來(lái)使用,以免正反向使用后,截留的雜質(zhì)污染分析柱。
3.直接填裝的短柱型保護柱,出現柱壓升或峰型變差時(shí),可不接分析柱進(jìn)行反向清洗,清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。
4.卡套式保護柱,柱芯替換時(shí),注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配,同時(shí)不易旋擰過(guò)緊,以防滑絲。
5.保護柱或柱芯一般不建議聲清洗,因可能對填料表面修飾有影響。
6.如同一保護柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保護柱需清洗并用流動(dòng)相平衡保護柱一段時(shí)間后,再接分析柱使用。