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想讓色譜柱用的久,得“好好用”才行!
點(diǎn)擊次數:1642 發(fā)布時(shí)間:2021-07-21
大家都知道一根色譜柱是比較昂貴的,作為一個(gè)色譜耗材,當然是讓色譜柱使用壽命盡量延長(cháng)以降低成本。而影響色譜柱的使用壽命的因素大多的使用時(shí)的操作不當導致?lián)p壞色譜柱。想讓色譜柱用的久,得“好好用”才行!
使用前,做好這三個(gè)階段的操作注意事項:
一、使用前準備:
因為生物的復雜性,樣品純化程度越,色譜柱的使用壽命就越長(cháng),因此樣品的預處理是十分重要的。比如溶劑的選擇、樣品過(guò)濾等。我們可以選擇色譜的純水作為溶劑,并且使用溶劑進(jìn)樣口過(guò)濾器再過(guò)濾一次雜質(zhì)、顆粒物等,這樣能較加“純凈”,對延長(cháng)色譜柱的使用壽命有的幫助作用。
吸濾頭
使用色譜柱前還要考慮其他的影響因素,如分析物的某些性質(zhì)同樣能影響色譜柱的使用壽命。酸、堿性物質(zhì)和蛋白質(zhì)類(lèi)生物大分子,它們能與固定相填料作用,或生成不可逆吸附層,改變填料表面特征,使色譜柱性能發(fā)生變化,終導致分離失效。
二、使用過(guò)程中:
避免機械沖擊,如果泵啟動(dòng)太快,流速和柱壓的瞬間升,柱床受到?jīng)_擊,會(huì )造成色譜柱損壞;
利用柱箱保持柱溫恒定,于柱溫承受的范圍,會(huì )增加對流動(dòng)相中化學(xué)物質(zhì)的吸附,還可能改變峰形,降低柱效,造成不可逆性的損傷。
逐漸改變工作流量和壓力,切勿進(jìn)行突然更改。流速過(guò)大,壓力升,會(huì )引起色譜填料沖垮、塌陷。
在適宜的pH范圍內運行,以硅膠作基質(zhì)的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內使用。長(cháng)期在pH>7或pH<2使用環(huán)境中,硅膠會(huì )逐漸溶解或者表面鍵合的官能團會(huì )逐漸流失。
避免進(jìn)行大體積的進(jìn)樣導致色譜柱載,不要過(guò)度用力擰色譜柱,可能會(huì )造成損壞。
三、使用后的清洗與儲存:
色譜柱使用后要注意清洗,用較的流動(dòng)相沖洗,如果還是無(wú)法清洗干凈,可以采用更的洗脫劑清洗。
色譜柱清洗完畢后,絕對不要將色譜柱存儲在冰箱或熱風(fēng)烤箱中,這可能導致固定相不可逆轉的損壞。使用前后輕拿輕放,注意不要磕碰或者用力撞擊導致?lián)p壞。
即使在采取了建議的預防措施之后,由于色譜柱的使用壽命有限,其性能也會(huì )受到影響。您應該定期注意色譜柱的性能,并采取措施觀(guān)察峰形的下降,保留時(shí)間的變化,分離度差或出現不需要的峰。