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液相色譜的分析結果數據如何來(lái)記錄和處理
點(diǎn)擊次數:1305 發(fā)布時(shí)間:2021-11-05
液相色譜儀主要的組成部件為壓泵、進(jìn)樣裝置、色譜柱、檢測器和色譜數據處理裝置。
1.壓泵
由于液相色譜所使用的色譜柱一般裝填小于10μm的固定相顆粒,故對流動(dòng)相有較大的阻力,所以對于泵的耐壓有一定的要求。除此之外,對于泵還有泵體材料耐化學(xué)腐蝕、輸出流量范圍寬、輸出流量穩定等要求。
壓泵可以分為恒壓泵和恒流泵兩大類(lèi)。
恒壓泵是指輸出恒定壓力的泵,當系統阻力不變時(shí)可以保持恒定流量,但系統阻力發(fā)生變化時(shí),就會(huì )影響到系統流量穩定,因此現在基本已不使用。恒流泵是指可輸出恒定體積流量的泵,又分為注射型泵和往復式柱塞泵兩類(lèi)。注射型泵由于其工作過(guò)程中需停流吸液以及價(jià)格昂貴等原因,目前基本不用于液相色譜儀中。往復式柱塞泵則可以提供低脈動(dòng)的連續穩定液流,應用于各種商品化儀器中,并衍生出了雙柱塞往復式并聯(lián)泵、雙柱塞往復式串聯(lián)泵、雙柱塞立驅動(dòng)的往復式串聯(lián)泵等多種設計。
2.進(jìn)樣裝置
在HPLC分析中由于使用了顆粒填料和壓的流動(dòng)相,因而對樣品的進(jìn)樣方式要求提,需要使樣品在進(jìn)入色譜柱頭時(shí)地注人其上端填料的中心,形成集中的一點(diǎn),以擴散效應影響降到。為實(shí)現以上要求有兩種設計:停流進(jìn)樣和六通閥進(jìn)樣,但現在停流進(jìn)樣技術(shù)已經(jīng)*被簡(jiǎn)單易用的六通閥進(jìn)樣方式所取代。
3.色譜柱
色譜柱一般使用內壁拋光的直型不銹鋼管作為柱管以獲得柱效。當使用粗內徑短柱和細內徑色潛柱時(shí),需要注意柱外效應所引起的色譜峰展寬,應該盡量縮短進(jìn)樣器至檢測器之間的連接管路,以獲得更小的柱外死體積。
HPLC色譜柱裝填的固定相,其基體材料多為多孔球形或無(wú)定形的硅膠顆粒,在壓下使用勻漿裝柱法裝填,并在色譜柱兩端使用多孔不銹鋼燒結材料的過(guò)濾片以阻擋流動(dòng)相中的微小機械雜質(zhì)進(jìn)入,并防止固定相流失。
4.檢測器
檢測器主要用于檢測經(jīng)色譜柱分離后的組分濃度變化。常用的檢測器為紫外/可見(jiàn)光檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器等。
5.色譜數據處理裝置
液相色譜的分析結果數據現已使用色譜數據工作站來(lái)記錄和處理。色譜工作站基于微型計算機的硬件,可以實(shí)現如下功能:
(1) 儀器操作參數的控制功能——色譜儀的可控參數,均可預設定并保存記錄,在運行樣品時(shí)自動(dòng)調用并傳輸至儀器。
(2) 數據采集和處理功能——可通過(guò)計算機和儀器之間的數據傳輸接口自動(dòng)采集色譜數據。并根據處理參數進(jìn)行數據處理,提供色譜圖的相關(guān)積分數據,還可以選擇不同的標準計算方式來(lái)對樣品自動(dòng)進(jìn)行計算,得到定性或定量的結果。還具有計算柱效、繪制工作曲線(xiàn)等其他功能。
(3) 計量認證功能——通過(guò)工作站完成對儀器的自動(dòng)認證程序,包括流量晶度、色譜柱控溫晶度、檢測器能量檢測等多項參數,并提供詳細的計量報告。 .
(4) 多臺儀器的自動(dòng)控制——可以適時(shí)控制多套HPLC、系統,并同時(shí)立進(jìn)行方法設定、樣品運行、數據采集處理。
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