C4反相色譜柱在使用前建議進(jìn)行柱的性能測

點(diǎn)擊次數：884 發(fā)布時(shí)間：2022-01-17

　　C4反相色譜柱在使用前，建議進(jìn)行柱的性能測試，并將結果保存起來(lái)，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。

　　在做柱性能測試時(shí)要按照C4反相色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行（出廠(chǎng)測試所使用的條件是醉佳條件），只有這樣，測得的結果才有可比性。

　　但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。

　　1、樣品的前處理

　　a、醉好使用流動(dòng)相溶解樣品。

　　b、使用預處理柱除去樣品中的性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。

　　c、使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。

　　2、流動(dòng)相的配制

　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：

　　a、流動(dòng)相對樣品具有一定的溶解能力，樣品組分不會(huì )沉淀在柱中（或長(cháng)時(shí)間保留在柱中）。

　　b、流動(dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應c、流動(dòng)相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果;降低柱壓降，延長(cháng)泵的使用壽命（可運用提溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度）。

　　d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，醉好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

　　e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實(shí)驗無(wú)法進(jìn)行。

　　f、在流動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

　　3、流動(dòng)相流速的選擇

　　因柱效是柱中流動(dòng)相線(xiàn)性流速的函數，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的C4反相色譜柱，要追求醉佳柱效，醉好使用醉佳流速。對內徑為4.6mm的C4反相色譜柱，流速一般選擇1ml/min，對于內徑為4.0mm柱，流速0.8ml/min為佳。

　　當選用醉佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(cháng)?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌度的方法以縮短分析時(shí)間（如使用反相柱時(shí)，可適當增加甲醇或乙腈的含量）。